Nb2-11細(xì)胞(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先調(diào)查細(xì)胞瓶是否無(wú)缺,培育液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和咱們聯(lián)絡(luò)。
2. 先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培育箱靜置數(shù)小時(shí)4h左右,安穩(wěn)細(xì)胞狀況,切忌在溫箱內(nèi)靜置過(guò)夜。
3. 靜置后鏡檢,拍照,記載細(xì)胞狀況。主張傳代后也拍照記載細(xì)胞成長(zhǎng)情況。
4. 貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,收集細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培育基,留8ml持續(xù)培育至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。
5. 細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培育基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆?,可補(bǔ)加2%血清。剛開(kāi)始傳代時(shí)主張一半用細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培育基,一半用客戶自備的培育基,使細(xì)胞逐步適應(yīng)培育條件,以免因不適應(yīng)而形成成長(zhǎng)狀況欠安。
6. 細(xì)胞胰酶消化液主張運(yùn)用PBS配制,
7. 因?yàn)榧?xì)胞培育過(guò)程外因太多,所以咱們的售后保障期為一周,超過(guò)一周的細(xì)胞咱們會(huì)酌情處理,但不提供免費(fèi)替換服務(wù)。 細(xì)胞運(yùn)送和保存:可選擇干冰運(yùn)送及發(fā)送復(fù)蘇存方式:1干冰運(yùn)送,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;收到后應(yīng)持續(xù)成長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞成長(zhǎng)狀況良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培育過(guò)程。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培育,而不適用于懸浮細(xì)胞培育,懸浮細(xì)胞可運(yùn)用滴片法;
2.所運(yùn)用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制作,并通過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片十分薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.假如需要更多成長(zhǎng)狀況共同的細(xì)胞,可以運(yùn)用較大的培育皿,但不宜過(guò)大,以避免培育液的浪費(fèi)和添加污染機(jī)率;
5.假如細(xì)胞貼壁成長(zhǎng)才能較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然曬干。
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