ELISA試劑盒操作過程:
1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,按照次第對應(yīng)別離參加100μl的規(guī)范品于空白微孔中(空白孔視為0號(hào)規(guī)范品,用醫(yī)用蒸餾水代替)。
2.別離標(biāo)記樣品編號(hào),參加100μl的稀釋樣品于空氣微孔中(不同的樣本選用不同的吸頭)。
3.將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘。
4.將酶標(biāo)板板取出,將其間的液體甩去,每個(gè)孔中悉數(shù)加滿使用洗刷液后,當(dāng)即甩去液體。
5.每個(gè)孔中加滿使用洗刷液后,細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去,在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
6.重復(fù)第5個(gè)過程5次,在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
7.在規(guī)范品孔和樣品孔中參加的100μl的酶標(biāo)巧合溶液。
8.將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9.將酶標(biāo)板取出,將其間的液體甩去,每個(gè)孔中悉數(shù)加滿使用洗刷液后,當(dāng)即甩去液體。
10.每個(gè)孔中再次加滿洗刷使用液后,室溫細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去,在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
11.重復(fù)第5個(gè)過程5次,在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
12.在每個(gè)孔中參加底物A 50μl后當(dāng)即參加底物B 50μl。悄悄振動(dòng)混勻。(A液.B液使用不同的吸頭加樣)。
13.將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反響15分鐘。
14.每個(gè)微孔中參加50μl的停止液,悄悄振動(dòng)混勻。
15.在酶標(biāo)儀上,450nm處測定OD;顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定。
16.依據(jù)制備的規(guī)范曲線,核算樣本含量。
ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)運(yùn)用,試劑應(yīng)視為感染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2.運(yùn)用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘。
3.濃縮洗刷液呈現(xiàn)結(jié)晶后.請于37°C孵育15分鐘。
4.濃縮樣品稀釋液呈現(xiàn)結(jié)晶后.請于3 7 °C孵育 15分鐘。
5.若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn).標(biāo)本可存放于2?8℃。不需及時(shí)試驗(yàn).標(biāo)本-20℃保存,防止反復(fù)凍融。
6.在反復(fù)清洗微孔板.并扣干微孔中的殘余液體.否則將下降**度.造成吸光度違背的假像。
7.加樣結(jié)束后.應(yīng)注意細(xì)微搖擺微孔反響條.以便使孔中的液體充沛混勻。
8.試劑盒保存于2?8°C. 請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)明。
以上是通蔚生物淺述ELISA試劑盒注意事項(xiàng)及操作過程,希望對大家有所幫助。
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